支原體感染的觀察與檢測(cè)：相差顯微鏡與熒光顯微鏡的應(yīng)用

支原體是一種常見(jiàn)的病原體，可引起各種疾病，其中最常見(jiàn)的是肺炎。支原體可獨(dú)立存活，不侵入機(jī)體組織與血液，直徑0.2～0.3um，結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，球形，沒(méi)有細(xì)胞壁，只有三層結(jié)構(gòu)的細(xì)胞膜，故具有較大的可變性，因此支原體感染的檢測(cè)對(duì)于診斷和治療支原體引起的疾病至關(guān)重要。

支原體主要黏附在細(xì)胞膜上生存，沒(méi)有細(xì)胞壁，通常呈圓形或橢圓形，一般呈末端尖銳、表面有許多小突起的形態(tài)特征，可以使用相差顯微鏡或者熒光顯微鏡觀察檢測(cè)支原體，有助于診斷和治療支原體引起的疾病。（注意事項(xiàng)：支原體與細(xì)胞破碎后溢出的細(xì)胞內(nèi)容物如線粒體等頗相似，應(yīng)細(xì)加區(qū)別。）

1.相差顯微鏡檢測(cè)法

相差顯微鏡能夠觀察活細(xì)胞和未染色的標(biāo)本，可以觀察到支原體呈暗色微小顆粒，有類(lèi)似布朗運(yùn)動(dòng)的表現(xiàn)，在細(xì)胞表面或細(xì)胞之間游離或成群分布的形態(tài)和排列方式。

2.熒光顯微鏡檢測(cè)法

熒光顯微鏡觀察需要使用特殊的熒光染料或抗體對(duì)支原體進(jìn)行標(biāo)記，根據(jù)熒光反應(yīng)判斷是否感染。一般來(lái)說(shuō)，支原體感染的細(xì)胞在熒光顯微鏡下會(huì)呈現(xiàn)出綠色或紅色熒光，這取決于所使用的熒光染料和抗體。

在呼吸道九聯(lián)檢查中也包含支原體肺炎檢測(cè)，在熒光顯微鏡下，如果觀察到紅色細(xì)胞外圍出現(xiàn)明亮的綠色熒光反應(yīng)，且形態(tài)為明顯的細(xì)胞膜或者胞漿，則可以判定為陽(yáng)性，這些綠色的熒光信號(hào)標(biāo)記的就是肺炎支原體。這是因?yàn)榉窝字гw在受到特定熒光染料的標(biāo)記后，會(huì)發(fā)出綠色熒光。

相反，如果紅色細(xì)胞周?chē)鸁o(wú)熒光或少量綠色熒光，且熒光較弱，則判定為陰性，這意味著樣本中未檢測(cè)到肺炎支原體。

明慧NE600正置生物實(shí)驗(yàn)顯微鏡適用觀察檢測(cè)支原體，提供明場(chǎng)、暗場(chǎng)、相襯的通用聚光鏡，可選配落射式垂直熒光照明器，光源采用 LED 光源，便于得到高分辨率、高對(duì)比度的圖像。

熒光顯微鏡觀察診斷支原體肺炎適合于各種臨床情況，尤其適用于首診檢測(cè)陰性，但復(fù)診仍然懷疑肺炎支原體感染的情況。由于其操作簡(jiǎn)便、結(jié)果直觀，因此成為一種簡(jiǎn)單、直觀、容易實(shí)現(xiàn)的觀察和診斷方式。